Análisis de PCR

 PCR con diabetes

Tema: Estudio génico (OPG, RANKL, Runx2 y receptores AGE) en cultivos de osteoblastos humanos de pacientes con diabetes mellitus tipo 2 y fractura de cadera. Influencia de los niveles de glucosa y AGEs.

Objetivo:Valorar si las variaciones de glucosa circulante generan alteraciones en la expresión de genes relacionados con la diferenciación y actividad osteoblástica (OPG, RANKL, Runx2 y AGER) en el cultivo primario de osteoblastos (hOB).

Muestra: Cultivos primarios de osteoblastos humanos (hOB) a partir de hueso trabecular

Tipo de ácido nucleico:    ARNm genómico                                   

Extracción de ADN

                                          Lisis: Kit High Pure RNA Isolation

                                          Separación: Kit High Pure RNA Isolation

                                          Purificación:  Kit High Pure RNA Isolation

                                          Gen a amplificar: OPG, RANKL, Runx2 y AGER

Tipo de PCR:                   PCR en tiempo real

Pasos                                Desnaturalización

                                          Hibridación
                                          Elongación

Visualización:                   EFO

Bibliografia:
www.revistadeosteoporosisymetabolismomineral.com/pdf/articulos/12012040100070014.pdf

Pruebas de tamizaje

Pruebas de tamizaje y confirmatorias para diabetes

Diagnóstico hipotético

Se emplea la investigación de signos y sintomas del paciente relacionados con la diabetes mellitus:

• Poliuria
• Polifagia
• Polidipcia
• Perdida de peso 

Antecedentes familiares
El examen físico que debemos realizar enfatizando en el sistema cardiovascular, dermatológico, neurológico y oftanmológico por que la diabetes provoca lesiones inaparentes en estos sistemas.

Diagnóstico confirmado

Tamizaje:
Prueba de glucosa basal
Prueba dde insulina en la sangre
Seraliza un (PTOG) o prueba de tolerancia oral de la glucosa

Prueba de confirmación
Se realiza una prueba de HbA1C: para saber los niveles de azucar en 3 meses.

Bibliografia:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/patientinstructions/000082.htm
www.scielo.org.co/pdf/rcog/v53n1/v53n1a06.pdf
http://apuntesmedicos.net/2008/05/27/diagnostico-de-la-diabetes-mellitus-y-otros-problemas-metabolicos-asociados-a-regulacion-alterada-de-la-glucosa/

Epigenómica

Epigenómica de la diabetes

Un componente epigenómico son los patrones de distribusión de las citosinas metiladasen secuencia de dinucleótidos CpG. La metilación marca los genes para su inactivación al interferir con la unión de factoresde transcripción sensibles a DNA metilado o bien al reclutar proteínas,lo cual se ve expresado en las células beta del páncreas y su incapacidad para producir insulina. Hoy se sabe que la dieta u otros factores ambientales regulan la expresión génica y que durante períodos críticos del desarrollo. L a hiperglucemia contribuye a la progreción de las complicaciones diabeticas.

Bibliografia: http://soched.cl/Revista%20Soched/3-2013/4.pdf

Alteraciones en la traducción

Alteraciones en la traducción en la diabetes
Investigadores del quipo Programación Genómica de Células Bea y Diabetes han analizado en profundidad los ARNlnc de las células beta pancreáticas que segregan insulina. Han identificado aproximadamente 700 genes que codifican para ARNlnc que son específicos de las células pancreáticas. Se lo puede considerar a este como un intrón(no va a sintetizar proteina)que controla genes que se expresan en la enfermedad, genes que determinan nuestros rasgos físicos y menara de actuar y pensar. El ARNlnc regula la expresión de un gen íntimamente relacionado con la diabetes llamado GLIS3. Son específicos para tipos de tejidos, relacionandolo con cáncer , ensamblado de ARNs y regulación transcripcional.

FUENTE:
http://themedicalbiochemistrypage.org/es/diabetes-sp.php#type2genetics
http://articulos.sld.cu/diabetes/2012/08/28/los-cientificos-identifican-nuevas-regiones-geneticas-relacionadas-con-la-diabetes-tipo-2/
http://blogs.laverdad.es/jalozate/2014/01/13/adn-no-codificante-y-diabetes-de-tipo-2/

Alteraciones en la Transcripción

Alteraciones en la Transcripción de la diabetes

 La diabetes MODY se presenta debido a alteraciones en los factores de transcripción hepatonucleares los cuales cumplen un papel fundamental en el desarrollo y proliferación de las células beta del páncreas, asi cmo su metabolismo funcional cuando ya son células maduras.

Factores de transcripción y su influencia

Los estudios moleculares ayudan a demostrar mutaciones en estos factores de donde se vera afectada la expresión del gen de la insulina o mutaciones en la enzima glucoquinasa, por lo tanto la producción de la insulina sera suficiente o nua. los factores de transcripción son proteinas intracelulares que regulan la transcripción del gen de la insulina a ARNm:

• El factor promotor de insulina 1 (IPF-1) (MODY 4).
• Los genes HNF-1 a(MODY3), 4a(MODY) y 1b, que se expresa en el hígado e islotes

Bibliografia:
http://themedicalbiochemistrypage.org/es/diabetes-sp.php
http://bq.unam.mx/wikidep/uploads/MensajeBioquimico/Mensaje_Bioq08v32p59_66_Tusie.pdf

Alteraciones de la replicación

Diabetes mellitus, alteraciones de la replicación

La diabetes se da por la mutaciones en el gen de la glucosinasa y de los factores transcripcionales HNF-1, HNF-4a, IPF-1,HNF-1b y HNF-3b han sido demostradas como la causa de la diabetes tipo MODY, un subtipo de la diabetes no dependiente de insulina con un patron de herencia autosómico dominante y una edad de aparición temprana. Mutaciones en estos genes resultan en un efecto en la sistesis o la secreción de la insulina. Cinco de estos genes codifican para factores transcripcionaes positivos de gen de insulina y otros genes específicos de la célula b.

Bibliografia:

http://www.imbiomed.com.mx/1/1/articulos.php?method=showDetail&id_articulo=1933&id_seccion=262&id_ejemplar=234&id_revista=2 

http://www.medicina21.com/especialidades/ver2/1805 

 

Caracteristias de la diabetes

Diabetes

Se desencadena cuando el organismo pierde su capacidad de producir suficiente insulina o de utilizarla, que permite usar glucosa a las células del organismo, en donde se convierte en energía para que funcionen los músculos y los tejidos.

Tipos de diabetes:

• diabetes tipo1: mueren si no tienen insulina.
• diabetes tipo 2: pueden pasar muchos años sin diagnostica.
• diabetes gestacional: Se diagnostica en el embarazo y puede desaparecer después del parto.

Bibliografia: 
http://www.idf.org/diabetesatlas/5e/es/que-es-la-diabetes
http://www.diabelife.com/620/que-es-la-diabetes-y-cuales-son-sus-caracteristicas/